動物(wù)實驗相關問題（一）

時間：2022-06-21 熱度：653

Q.實驗小(xiǎo)鼠标記編号方法有(yǒu)哪些？
A.答(dá)案
（1）染色法：以染色部位、顔色不同來标記區(qū)分(fēn)實驗動物(wù)；
（2）耳孔法：根據打在動物(wù)耳朵上的部位和孔的多(duō)少，來區(qū)分(fēn)實驗動物(wù)的方法，可(kě)标記三位數之内的号碼；
（3）烙印法：造成輕微損傷；
（4）挂牌法：将編好的号碼烙印在金屬牌上，挂在實驗動物(wù)頸部、耳部、肢體(tǐ)或籠具(jù)上；
（5）其他(tā)：籠子編号法、斷趾編号法、剪尾編号法、被毛剪号法等。
Q.C57BL/6N小(xiǎo)鼠正常體(tǐ)重範圍是？
A.答(dá)案
雄性
雌性
體(tǐ)重（g）日齡（天）
體(tǐ)重日齡（天）
<12 <23
<12 <23
13-15 24-28
13-15 24-31
16-18 29-35
16-18 32-52
19-21 36-45
19-21 53-77
22-24 45-63
22-24 78-105
Q.常見的大鼠麻醉方法有(yǒu)哪些？
A.答(dá)案
（1）腹腔麻醉
把異氟烷和脂肪乳混合做成乳化異氟烷，腹腔注射，3分(fēn)鍾麻醉，30分(fēn)鍾清醒。
（2）吸入麻醉
将大鼠封入密封缸中(zhōng)，注入液态吸入麻醉藥。
（3）經口氣管插管
腹腔麻醉，四肢仰面固定，上下切牙用(yòng)絲線(xiàn)系住作(zuò)牽引，操作(zuò)者頭戴額鏡，對面放置好光源，牽出舌頭和下切牙絲線(xiàn)一起由左手捏住，上切牙絲線(xiàn)由助手提着或用(yòng)止血鉗夾住用(yòng)自己的前胸固定，拉動絲線(xiàn)使頭部上提和口充分(fēn)張開，右手持18G或16G套管針，看到聲門既可(kě)插管。
Q.小(xiǎo)鼠灌胃操作(zuò)時有(yǒu)哪些要點需要注意？
A.答(dá)案
（1）小(xiǎo)鼠需要固定好，頭和軀體(tǐ)要保持一條直線(xiàn)，并且灌胃時使小(xiǎo)鼠成豎直位，頭向上；
（2）灌胃劑量可(kě)選0.1 mL/10 g或0.2 mL/10 g，根據實際情況決定，防止小(xiǎo)鼠灌胃後俯卧喘息；
（3）操作(zuò)前将灌胃針安(ān)在注射器上大緻測量一下從口腔到胃内的位置的長(cháng)度,根據此距離确定插入深度,成年小(xiǎo)鼠插入大約3 cm；
（4）從小(xiǎo)鼠的嘴角進針，進去後讓灌胃針順着小(xiǎo)鼠的上腭壓住它的舌頭進入食道，當中(zhōng)有(yǒu)突破感，突破感過後和灌液體(tǐ)時無明顯阻力；
（5）成年小(xiǎo)鼠每次最大可(kě)灌1.0 mL。
Q.如何通過形态鑒定大小(xiǎo)鼠的日齡？
A.答(dá)案
1日齡鼠仔裸體(tǐ)鮮紅，3日齡耳殼露出表皮，4日齡期待疤痕脫落，5日齡能(néng)翻身，8日齡能(néng)爬行，10日齡能(néng)聽見聲音，9-11日齡全身被白毛且長(cháng)出門齒，13-15日齡眼皮張開、能(néng)跳躍和抓取東西，18日齡後能(néng)自行采食和獨立生活。
Q.如何提升尾靜脈注射的成功率？
A.答(dá)案
（1）注射前可(kě)用(yòng)50 ℃左右熱水浸泡小(xiǎo)鼠尾部約1 min左右，見尾靜脈明顯充盈起來即可(kě)；
（2）拉平拉緊尾部，使得尾部靜脈處于一個平面上；若無法完成，可(kě)用(yòng)手托起或踮起部分(fēn)尾部使尾靜脈伸展；
（3）注射前用(yòng)酒精(jīng)塗抹尾部，使尾靜脈完全暴露；
（4）注射時要斜面向上，選擇平行與尾靜脈的方向刺入，不要有(yǒu)任何角度，刺入約0.5-1 cm後退針但不要完全退出，斜面退出約一半時如果針在血管裏會有(yǒu)血冒出，然後再次進針，進針距離要短于第一次進針距離，否則會刺穿血管。然後推注液體(tǐ)，此時應該不會感到有(yǒu)很(hěn)大阻力，可(kě)以看到尾靜脈血管變白，但是周圍組織沒有(yǒu)腫，此時順利完成尾靜脈注射；
（5）不推薦根據推注壓力感覺是否進入血管，因為(wèi)這樣會浪費一部分(fēn)細胞，導緻計數不準。
Q.VSV注射滴度和注射體(tǐ)積一般是多(duō)少？
A.答(dá)案
跨多(duō)級的VSV注射滴度為(wèi)10⁹ IFU/mL，不跨突觸VSV-ΔG 注射滴度為(wèi)10⁷ IFU/mL。在大小(xiǎo)鼠标記試驗中(zhōng)，病毒注射體(tǐ)積根據實驗方法（需求、滴度、表達量）的不同也存在差異，推薦的注射體(tǐ)積中(zhōng)樞注射一般為(wèi)50-300 nL，外周注射一般為(wèi)1-3 μL。
Q.RV注射滴度和注射體(tǐ)積一般是多(duō)少？
A.答(dá)案
10⁸ IFU/mL。推薦的注射體(tǐ)積為(wèi)混合後的總體(tǐ)積100-300 nL，注射速度為(wèi)20-50 nL/min。若目标核團較小(xiǎo)或Cre在該區(qū)域的外周圍也有(yǒu)較多(duō)表達，為(wèi)控制起始感染區(qū)域的特異性，可(kě)适當降低注射AAV病毒的體(tǐ)積及速度；反之，如需标記大範圍或Cre隻在局部區(qū)域高特異性表達，可(kě)增加AAV注射的體(tǐ)積與速度。
Q.RV-ENVA注射後什麽時候可(kě)以取材？
A.答(dá)案
為(wèi)保證RV-EnvA-ΔG-DsRed注射時已有(yǒu)高豐度表達的TVA介導其感染神經元及G蛋白補償其跨突觸能(néng)力，AAV注射後需表達兩周或三周，然後在同一區(qū)域注射RV-EnvA-ΔGdsRed；RV注射後一般以10天為(wèi)标準時間犧牲動物(wù)，而此時間也可(kě)控制在7-12天（所有(yǒu)實驗樣本都需保證采用(yòng)一緻的時間窗口）。
Q.VSV注射後什麽時候可(kě)以取材？
A.答(dá)案
大腦中(zhōng)樞注射VSV後，對動物(wù)具(jù)有(yǒu)較強毒性，感染VSV後存活時間一般為(wèi)3-4天（中(zhōng)樞注射），動物(wù)體(tǐ)質(zhì)不同，存活時間也有(yǒu)差異。外周注射存活時間延長(cháng)2~4天。因此，病毒注射後，可(kě)根據環路連接級數多(duō)少在不同時間點取樣。在中(zhōng)樞，跨突觸數目經驗值為(wèi)：跨1~2級，24~36小(xiǎo)時；跨2~3級， 30~ 48小(xiǎo)時；需經常查看動物(wù)狀态，以免動物(wù)提前死亡，影響正常取樣。

上一篇：神經領域實驗相關問題

下一篇：動物(wù)實驗常見問題（二）

返回列表

最新(xīn)新(xīn)聞

動物(wù)實驗相關問題（一）

Q.實驗小(xiǎo)鼠标記編号方法有(yǒu)哪些？

Q.C57BL/6N小(xiǎo)鼠正常體(tǐ)重範圍是？

Q.常見的大鼠麻醉方法有(yǒu)哪些？

Q.小(xiǎo)鼠灌胃操作(zuò)時有(yǒu)哪些要點需要注意？

Q.如何通過形态鑒定大小(xiǎo)鼠的日齡？

Q.如何提升尾靜脈注射的成功率？

Q.VSV注射滴度和注射體(tǐ)積一般是多(duō)少？

Q.RV注射滴度和注射體(tǐ)積一般是多(duō)少？

Q.RV-ENVA注射後什麽時候可(kě)以取材？

Q.VSV注射後什麽時候可(kě)以取材？

人工(gōng)客服

投訴建議

咨詢熱線(xiàn)

雄性		雌性
體(tǐ)重（g）	日齡（天）	體(tǐ)重	日齡（天）
<12	<23	<12	<23
13-15	24-28	13-15	24-31
16-18	29-35	16-18	32-52
19-21	36-45	19-21	53-77
22-24	45-63	22-24	78-105