免疫電(diàn)鏡技(jì )術簡介（IEM）
免疫電(diàn)鏡技(jì )術（immunoelectron microscopy，IEM）又(yòu)稱為(wèi)免疫細胞化學(xué)技(jì )術，是在免疫組織化學(xué)技(jì )術（immunohistochemistry）的基礎上發展起來的，它是利用(yòng)抗原與抗體(tǐ)特異性結合的原理(lǐ)，在超微結構水平上定位、定性及半定量抗原的技(jì )術方法。
免疫電(diàn)鏡技(jì )術（Immunoelectron microscopy，IEM）也稱免疫細胞化學(xué)技(jì )術，是由免疫化學(xué)技(jì )術與電(diàn)鏡技(jì )術相結合的一種實驗技(jì )術手段，是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體(tǐ)結合定位的一種方法學(xué)。
抗原、抗體(tǐ)的相互作(zuò)用(yòng)是免疫化學(xué)反應的基礎，它具(jù)有(yǒu)高度的特異性，結合電(diàn)鏡的高分(fēn)辨和放大特點，可(kě)以在超微結構和分(fēn)子水平上研究各種組織和細胞内的免疫反應，并能(néng)精(jīng)确定性、定位和半定量，使形态與機能(néng)緊密結合。
根據标記方法的不同，免疫電(diàn)鏡技(jì )術分(fēn)為(wèi)免疫鐵蛋白技(jì )術、免疫酶标技(jì )術和免疫膠體(tǐ)金技(jì )術，其中(zhōng)目前應用(yòng)較多(duō)的是膠體(tǐ)金技(jì )術。
免疫膠體(tǐ)金電(diàn)鏡染色主要具(jù)有(yǒu)以下幾個優點：
（1）膠體(tǐ)金能(néng)穩定并迅速地吸附蛋白，而且蛋白的生物(wù)活性不發生明顯改變，可(kě)制備抗體(tǐ)-膠體(tǐ)金、蛋白A-膠體(tǐ)金、卵白素-膠體(tǐ)金、植物(wù)凝集素-膠體(tǐ)金等用(yòng)于免疫電(diàn)鏡；
（2）在電(diàn)鏡下金顆粒電(diàn)子密度高、圓形且界線(xiàn)清晰，易于辨認，定位比酶反應物(wù)更精(jīng)确；
（3）膠體(tǐ)金标記物(wù)易于制備，并可(kě)以根據需要制備大小(xiǎo)不同（1～150nm）的膠體(tǐ)金，因此可(kě)進行免疫電(diàn)鏡的雙重或多(duō)重标記；
（4）金顆粒能(néng)發射強烈的二次電(diàn)子，是掃描電(diàn)鏡的理(lǐ)想标記物(wù)；
（5）膠體(tǐ)金經過銀顯影增強後，金顆粒外周吸附大量銀顆粒而呈現黑色或黑褐色，因此也能(néng)用(yòng)于光學(xué)顯微鏡觀察。此外，膠體(tǐ)金還能(néng)用(yòng)于冷凍蝕刻标本的免疫标記。
免疫電(diàn)鏡膠體(tǐ)金标記法近年來被成功地應用(yòng)于生物(wù)學(xué)的各個方面，并取得了長(cháng)足的進展。在腎病、腫瘤、神經病變、病毒檢測以及肺部炎症等多(duō)個領域中(zhōng)，為(wèi)解決一些醫(yī)學(xué)上的微觀結構問題提供了很(hěn)好的幫助。
免疫電(diàn)鏡技(jì )術在腎病理(lǐ)中(zhōng)得到廣泛的應用(yòng)。通過設計特異性抗體(tǐ)結合膠體(tǐ)金，可(kě)以根據免疫病理(lǐ)學(xué)的原理(lǐ)檢測腎小(xiǎo)球内的結構蛋白成分(fēn)或緻密物(wù)的性質(zhì)和分(fēn)布，為(wèi)腎病的診斷及發病機制的研究提供更精(jīng)确的信息和診斷依據。
免疫膠體(tǐ)金技(jì )術在腫瘤研究中(zhōng)也得到廣泛的應用(yòng)。腫瘤組織常用(yòng)其相對特異性的标記物(wù)，如肝癌組織過量表達甲胎蛋白、胰島素樣生長(cháng)因子I等，結腸癌異常表達癌胚抗原，神經内分(fēn)泌腫瘤則異常分(fēn)泌一些激素如Chromogranin A等，使用(yòng)免疫電(diàn)鏡技(jì )術檢測這些抗原表達，有(yǒu)助于相關腫瘤的分(fēn)型、診斷和鑒别診斷。
免疫金标記法可(kě)以明顯地提高液體(tǐ)樣品中(zhōng)待檢病毒的檢出率，靈敏度較高，可(kě)廣泛應用(yòng)于各種病毒，特别是小(xiǎo)球形狀病毒的電(diàn)鏡診斷。
随着分(fēn)子生物(wù)學(xué)和生物(wù)化學(xué)研究的發展，特定蛋白質(zhì)在超微結構中(zhōng)的定位顯得尤為(wèi)重要。盡管光學(xué)顯微鏡經過技(jì )術革新(xīn)湧現了許多(duō)超高清拍攝技(jì )術，但是目前其對于蛋白質(zhì)的精(jīng)确定位還具(jù)有(yǒu)一定的難度。
電(diàn)子顯微鏡由于其高分(fēn)辨的特點，依然是研究特定蛋白質(zhì)作(zuò)用(yòng)機理(lǐ)和功能(néng)不可(kě)缺少的工(gōng)具(jù)。
不同于免疫組化技(jì )術,免疫電(diàn)鏡技(jì )術，或稱為(wèi)電(diàn)鏡免疫标記技(jì )術(immunoelectron microscopy,IEM)，該方法為(wèi)精(jīng)确定位超微結構中(zhōng)各種抗原在組織和細胞超微結構上的定位、研究細胞結構與功能(néng)的關系及其在病理(lǐ)情況下所發生的變化提供了有(yǒu)效的手段。
免疫電(diàn)鏡較之常規透射電(diàn)鏡技(jì )術，在制樣難度上要求更高，因為(wèi)既要保持良好的超微結構，又(yòu)要保證抗原的活性。而實際上，抗原是由生物(wù)大分(fēn)子組成的,在固定劑和脫水劑極有(yǒu)可(kě)能(néng)導緻抗原二級結構或高級結構的變化；其次，過高濃度的固定劑、脫水過程以及包埋劑都難免會破壞細胞或組織的抗原活性。另一方面，目标抗原是否暴露于能(néng)夠被抗體(tǐ)識别的表面位置，也是免疫電(diàn)鏡技(jì )術的另一個難點所在。
重慶宣尊生物(wù)科(kē)技(jì )有(yǒu)限公(gōng)司
您身邊的科(kē)研定制化服務(wù)專家
宣尊生物(wù)透射電(diàn)鏡實驗中(zhōng)心在為(wèi)各位客戶提供開放式、高質(zhì)量透射電(diàn)鏡的制片、拍照、診斷一站式服務(wù)的同時，不斷深耕免疫電(diàn)鏡技(jì )術！
如您需要免疫電(diàn)鏡具(jù)體(tǐ)檢測信息，可(kě)直接撥打全國(guó)服務(wù)熱線(xiàn)023-86185422詳詢！
