逆轉錄病毒
逆轉錄病毒（Retrovirus），又(yòu)稱反轉錄病毒，是一種RNA病毒，其兩端為(wèi)長(cháng)末端重複序列（LTR）。該病毒呈球形，有(yǒu)包膜，表面有(yǒu)刺突，顆粒直徑為(wèi)100nm左右。逆轉錄病毒基因組有(yǒu)三個基因：Gag-編碼病毒的核心蛋白；Pol-編碼逆轉錄酶；Env-編碼病毒的被膜糖蛋白。
逆轉錄病毒包裝(zhuāng)及侵染細胞過程
逆轉錄病毒包裝(zhuāng)采用(yòng)三質(zhì)粒或四質(zhì)粒系統進行包裝(zhuāng)，收集細胞培養上清，通過超速離心濃縮純化和收集病毒。
滴度檢測方法：定量PCR檢測幹擾後細胞基因組中(zhōng)外源DNA拷貝數。
滴度檢測原理(lǐ)：逆轉錄病毒介導外源基因以逆轉錄方式整合進目的細胞基因組。
逆轉錄病毒基因表達時，需在逆轉錄酶的作(zuò)用(yòng)下首先将RNA逆轉錄成DNA，形成DNA整合前複合體(tǐ)，随後進入細胞核随機整合到宿主細胞DNA上，經過轉錄、翻譯，完成基因的表達。
逆轉錄病毒特點
逆轉錄病毒的最大特點在于其特異性感染分(fēn)裂期細胞，這是因為(wèi)隻有(yǒu)當被感染細胞處于細胞分(fēn)裂期間，逆轉錄病毒DNA基因組才能(néng)接觸到宿主細胞的遺傳物(wù)質(zhì)。
基于上述特性，逆轉錄病毒适用(yòng)于幹細胞相關的大量研究，如神經幹細胞研究、造血幹細胞研究。體(tǐ)内應用(yòng)時，逆轉錄病毒适用(yòng)于研究成年新(xīn)生神經元或膠質(zhì)前體(tǐ)細胞的工(gōng)作(zuò)。
逆轉錄病毒應用(yòng)案例
1、客戶發表文(wén)章：Scientific Reports. (IF=4.122). Xiong Y S,et.al. (2015). Early treatment of minocycline alle-viates white matter and cognitive impairments after chronic cerebral hypoperfusion. [逆轉錄病毒, 卒中(zhōng)]
注射部位：小(xiǎo)鼠側腦室SVZ區(qū)
載體(tǐ)：pROV-EF1a-GFP
病毒載體(tǐ)：逆轉錄病毒
病毒滴度：1E+8cfu/mL
注射體(tǐ)積：1ul
2、應用(yòng)案例：Nature.(IF=41.577).Yu YC,et.al. (2009).Specific synapses develop preferentially among sister excitatory neurons in the neocortex. [逆轉錄病毒, 發育]
注射部位：E12-E13小(xiǎo)鼠胚胎
病毒載體(tǐ)：逆轉錄病毒
注射體(tǐ)積：1ul
