一篇被引用(yòng)千次的論文(wén)，了解AAV血清型1-9

首先，解讀這篇文(wén)章之前，先給沒有(yǒu)基礎的同學(xué)介紹一下AAV。

AAV屬于微病毒科(kē)，是一種長(cháng)度為(wèi)26 nm、長(cháng)度為(wèi)4.7 kb的線(xiàn)形 DNA病毒。AAV通常與腺病毒同時存在，是在腺病毒制劑中(zhōng)首次發現的一種污染物(wù)質(zhì)。

AAV單股 DNA含有(yǒu) ITR, Cap, Rep 3個組分(fēn).ITR為(wèi)發卡型結構，為(wèi) AAV拷貝與封裝(zhuāng)所需要的惟一順式元件；Cap為(wèi)病毒的核漿蛋白編碼，使得病毒具(jù)備了侵染的能(néng)力；而 Rep，則是負責病毒基因的複制與整合。

基于野生型AAV構建的重組腺相關病毒（rAAv）,理(lǐ)論上可(kě)攜帶小(xiǎo)于5kb分(fēn)人基因（通常小(xiǎo)于2.8kb）。

AAV病毒是一種新(xīn)型的病毒，其病毒具(jù)有(yǒu)多(duō)種類型，而不同類型的病毒對不同組織/器官具(jù)有(yǒu)不同的轉染效率（組織嗜性），其表達量及持續時間也各不相同，所以有(yǒu)必要來了解不同類型的病毒之間的差異。

  在AAV1-9的包裝(zhuāng)載體(tǐ)上添加熒光素酶基因cDNA，構建不同血清型的AAV，尾靜脈（TV）注射後，在注射後的7、14、29、56和100天（days post-iniection,dpi）對注射不同的血清型動物(wù)進行成像，通過luc的表達量測定不同血清型AAV的表達。

  AAV1、6、7、8、9的表達量最快，luc的表達量在7dpi即可(kě)檢出；AAV4、AAV5的表達率适中(zhōng)，其表達在14dpi，AAV2、3的表達最為(wèi)緩慢，隻有(yǒu)在29dpi時，Luc的表達才能(néng)檢測出來。

AAV2、3、4、5為(wèi)低表達組（Low-expressuon Group）,表達範圍5,000-200,000 photons/second/cm²；

AAV1、6、8為(wèi)中(zhōng)表達組（Medium-expression Group）,表達範圍為(wèi)15,000-200,000 photons/second/cm²

AAV7、9為(wèi)表達組（Hight-expression Group）High-expression Group，表達範圍為(wèi)10,000-1,000,000 photos/second/cm²

AAV9最光譜，在所有(yǒu)組織中(zhōng)均表達，且表達水平很(hěn)高；

AAV7多(duō)種組織中(zhōng)表達，但在大腦、睾丸、腎髒中(zhōng)無表達；

AAV1主要在肝髒中(zhōng)表達，其次是心髒和後肢骨骼肌；

AAV6主要在心髒中(zhōng)表達，其次是肺；

AAV8主要在心髒中(zhōng)表達，其次是排腸肌、腘繩肌和肝髒

AAV2主要在肝髒中(zhōng)表達，其次是心髒和腘繩肌

AAV4主要在心髒中(zhōng)表達，其次是肺

AAV5僅在肝組織中(zhōng)表達

AAV3的表達水平更低，主要在心髒和肝髒中(zhōng)表達

  本項目以AAV1型，6-9型小(xiǎo)鼠為(wèi)研究對象，采用(yòng)免疫組化技(jì )術，分(fēn)析其在AAV1型和6-9型的小(xiǎo)鼠體(tǐ)内的存留量，确定其在AAV1型和6-9型小(xiǎo)鼠體(tǐ)内的存流量。發現AAV1、AAV4的濃度在1-6h後降低較快，AAV6-8濃度降低較快，AAV9濃度降低較慢。48h後，每個血清中(zhōng)的初始表達量不到1%。

  對100dpi後，不同血清型的組織樣本進行了DNA測序，結果顯示，不同血清型組織樣本中(zhōng)，HBV的DNA序列有(yǒu)明顯的變化。

  在進行了100天的尾靜脈注射後，以超音波心動圖來評估其對心功能(néng)的作(zuò)用(yòng)，并發現所有(yǒu)被測的AAV血清型對心功能(néng)沒有(yǒu)影響。

  總體(tǐ)來說，這篇文(wén)獻對AAV1-9血清型進行了比較全面的試驗研究，對于剛接觸AAV的同學(xué)來說，看懂這篇論文(wén)會對不同的AAV血清型有(yǒu)個初步的了解，如果要進一步深入學(xué)習，當然要看更多(duō)的文(wén)獻。

  看完了這篇被引用(yòng)1000多(duō)次的論文(wén)還不過瘾的同學(xué)，可(kě)以挑戰下這篇2019年2月1日發表與Nature Reviews Drug Discovery，影響因子64.797的文(wén)章“Adeno-associated virus vector as a platform for gene therapy delivery”，看完這篇文(wén)章，“凡爾賽文(wén)學(xué)”你也行。

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